第219章 遇到困难,找江河(1 / 5)
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蔡卓群:“王教授,您看这怎么处理?”
王晓晴分析:“茎环结构的自由能太低,导致构象过于稳定,如果在现有的反应体系下,常规的提高退火温度已经没用了。”
蔡卓群点点头:“那我们需要重新设计引物序列吗?可是如果要重新设计,得耽误很多时间。”
王晓晴皱着眉头。
她一时间也没什么好的办法。
第一反应是通过调整体系的镁离子浓度,或者重新设计巢式pcr的引物结构来从根本上解决非特异性结合。
但似乎,都需要耗费大量的时间去重新摸索。
就在这时。
江河回来了。
他察觉到气氛不对,随口问道:“怎么了?”
“老江,遇到麻烦了,扩增曲线乱了,引物二聚体和非特异性扩增把真实信号盖住了,王教授正在想怎么调整引物结构。”
江河走过去,看了一眼之后,淡然道:“去拿一瓶dmso(二甲基亚砜)过来。”
众人一愣。
王晓晴也转头看向他。
江河解释:“这套引物的gc含量在65%以上,自身容易形成复杂的二级结构,这很常见,重做引物太费事了,直接在pcr的反应体系里,加入终浓度为5%的dmso即可。” ↑↑